Development of a tissue engineered in vitro blood-air barrier model to study respiratory viral infections


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Medikal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2024

Tezin Dili: İngilizce

Öğrenci: NEVAL SEVİNÇ ÖZDEMİR

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Vasıf Nejat Hasirci

Eş Danışman: Halime Kenar

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışma, alveolar kan-hava bariyerini taklit etmek üzere bir in vitro deney modeli geliştirmeyi, bu modelin gerçek dokuyu taklit etme yeteneğini ve alt solunum yolu viral enfeksiyonları ile bariyer bileşenlerinin etkileşimini çalışmak için uygunluğunu test etmeyi amaçlamaktadır. Çalışmada geliştirilen model kan-hava bariyerinde bulunan bazal membranın (BM) matriks yapısını taklit etmek için rasgele yönlü nanofiber yapısına sahip, ince (<20 m) bir elektroeğrilmiş poli(Ɛ-kaprolakton) (PCL) ağ membran içermektedir. BM yapısında bulunan kolajen tip I, fibronektin ve laminin 511 proteinleri ile kaplanan bu membran, alveolar epitel (A549) ve endotel (pHUVEC) hücrelerinin birbirlerinden ayrılmış halde karşılıklı yüzeylere tutunması, tek tabaka halinde çoğalması, besin geçişine izin vererek hücrelerin ortak kültürü ve hava-sıvı arayüzü (ALI) oluşturulması için etkili bir zemin görevi görmüştür. Her iki hücre tipi de karakteristik fenotipik özelliklerini membran üzerinde göstermiş ve hücreler arasında kurulan sıkı bağlantılar gösterilmiştir. Farklı boyutlu moleküllere karşı yapılan geçirgenlik testleri ve transepiteliyal elektriksel direnç ölçümleri modelin hücre ekiminden sonra 7. gün itibariyle bariyer işlevine sahip olduğunu göstermiştir. Son olarak, modelin viral enfeksiyon çalışmalarında kullanılabilirliği SARS-CoV-2 enfeksiyonu gerçekleştirilerek incelenmiştir. Elde edilen sonuçlar, geliştirilen bu modelin kan-hava bariyerinde gerçekleşen viral enfeksiyon mekanizma ve etkileşimlerini incelemek ve terapötik yaklaşımları denemek için değerli bir araç olduğunu göstermiştir.