The effect of cdp-choline on mitophagy and mitochondrial dynamics in A monocytic cell line
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Medikal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2019
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: SÜLEYMAN BOZKURT
Danışman: Devrim Öz Arslan
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Mitokondrinin otofaji ile seçici olarak parçalanması mitofaji olarak adlandırılmaktadır. Hasarlı ve işlevsiz mitokondriler hücresel bozukluklara sebep olarak; nörodejeneratif, metabolik ve kardiyovasküler gibi hastalıklara yol açabilmektedirler. Fosfatidilkolin üretimi için Kennedy yolağında bir ara ürün olan CDP-kolin (CDP-k), potansiyel nöroprotektif özelliklere sahiptir. Mitofaji sırasında hücresel membranlarda en çok bulunan fosfatidilkolin seviyesi azalır. Bu çalışmada, CDP-k'nin U937 monosit hücreler üzerinde, mitofajiye olan etkisini araştırdık. Çeşitli CDP-k koşulları kullanılarak CCCP ile mitofaji dört saat boyunca indüklendi. Western blotlama yöntemi ile mitokondrial dinamik ve mitofajiye ile ilişkili proteinlerin seviyesine bakıldı. Mitofaji sırasında PINK1, DRP1, MFN2, COXIV ve LC3B proteinlerin düzeylerinin arttığını belirledik. CDP-k varlığında ise, DRP1 ve MFN2 proteinlerin seviyelerinde değişiklikler olduğunu saptadık. Mitokondriya özgü boyalar kullanılarak, akış sitometrisi ve konfokal mikroskopi ile mitokondriyal membran potansiyeli, kütle ve süperoksit üretimini ölçüldü. Mitofaji indüksiyonu ile azalan mitokondriyal kütle, CDP-k tedavisi sonrasında tersine dönmüştür. Mitofaji uygulanmış U937 hücrelerinde, mitokondriyal füzyon veya fisyon ve mitokondriyal kütlede meydana gelen değişiklikler, CDP-k'nin mitokondrial dinamikler üzerine modülatör bir rolü olduğunu göstermektedir. Ayrıca, mitofaji indüklenmiş U937 hücrelerinde yüksek olan mitokondriyal süperoksit, CDP-k varlığında azalmıştır. Mitofaji indüklenmiş hücrelerde CDP-k mitokondriyal membran oluşumuna katkı sağlayabileceği için bu hücrelerde koruyucu bir özelliği olabileceğini öne sürmekteyiz. Böylece, üretilen yeni mitokondriler ise hücreleri stresten hızlı bir şekilde kurtararak hücrelerin hayatta kalmalarını sağlayabilir.