SYNTHESIS OF NEUROPEPTIDE Y AND DEVELOPMENT OF AN ANTI-NPY MONOCLONAL ANTIBODY FOR PRECLINICAL TREATMENT OF PANCREATIC CANCER
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Medikal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2023
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: Nurdan Çam
Danışman: Özge Can
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Nöropeptitler, çeşitli katı tümörlerde anjiyogenez, uzak metastaz oluşumu ve tümör büyümesi gibi birçok süreçte yer alır. Bu alanda ortaya çıkan adaylardan biri nöropeptit Y (NPY) reseptörleridir. NPY'nin bilinen beş farklı reseptörü vardır ve bunların bazılarının ekspresyonu insan pankreas kanseri dokusunda da bulunmuştur. NPY ligandına doğrudan bağlanan ilaçlar, küçük moleküllü inhibitörler veya monoklonal antikorlar henüz ticari olarak mevcut değildir. Bu kapsamda, çalışmada pankreas kanserini önlemeye yönelik yeni tedavi yaklaşımları oluşturabilmek amacıyla NPY peptidinin sentezlenmesi ve hibridoma teknolojisi kullanılarak NPY moleküllerini spesifik olarak nötralize eden monoklonal antikorların üretilmesine yönelik araştırmalar yapılmıştır. Bu çalışmada, 36 aminoasitten oluşan NPY molekülünün peptit sekansından sentetik peptitlerin sentezi katı faz peptit sentezi metodu ile gerçekleştirilmiştir. Monoklonal antikor üretimi çalışmalarında kullanılmak üzere sentezlenen NPY peptidlerinin HPLC analizleri, saflaştırılmaları ve fizikokimyasal karakterizasyonu gerçekleştirildi. Monoklonal antikor üretiminin immünizasyon aşamasında, immünojen olarak kullanılan peptit, enjekte edilen peptit konsantrasyonu ve zaman aralıkları optimize edildi. Daha sonra, hibridoma teknolojisi uygulandı ve NPY peptidine yönelik monoklonal antikor üretiminin varlığı incelendi. Sonuç olarak, NPY peptidi başarıyla sentezlendi. Bağışıklama çalışmalarında, farelerde NPY peptidine karşılık yüksek bağışıklık tepkileri oluştu. Hibridoma teknolojisi ile monoklonal antikor üretimi çalışmaları sonunda, NPY antijenine karşı monoklonal antikor üretiminin varlığı tespit edilmiştir.