İnsan Katelisidin Peptit Antibiyotiklerinden Esinlenerek Geliştirilen Antimikrobiyal Peptitlerin Hipokampal Nöronlar Üzerine Etkilerinin İncelenmesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Fizyoloji Tezli Yüksek Lisans Programı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2019
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: MUSTAFA TİTİZ
Danışman: Güldal Süyen
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Antimikrobiyal peptitler (AMP), anti-enflamatuar ve immünomodülatör aktivitelerinin yanı sıra, kanser hücrelerinden bakterilere, mayalara, mantarlara ve virüslere karşı geniş bir antibiyotik aktivite sahip küçük moleküllerdir. Çalışmada, insan katelisidin peptit antibiyotiklerinden esinlenilerek geliştirilen özgün nitelikteki TN-1, TN-2, TN-3, TN-6 ve TN-7 peptitlerinin hipokampal nöronlar üzerindeki toksisite ve antioksidan özelliklerinin incelenmesi, ayrıca Bcl-2, Bax, Wnt5a ve NF-κB genlerinin ifadeleri üzerine etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Bu amaç doğrultusunda postnatal 3 günlük balb-c fareler kullanılarak primer hipokampal nöron kültürü oluşturmuş, sonrasında etkileri araştırılmak istenen peptitler farklı konsantrasyonlarda (0.5 – 32 μg/ml) hücre kültürüne eklenmiş ve 16 saat inkübe edilmiştir. Inkübasyon ardından, peptitlerin hücre canlılığı üzerine etkilerini değerlendirmek amacıyla Sulforodamin B (SRB) sitotoksisite testi uygulanmış, en az toksik etki gösteren peptitler saptanmıştır. Antioksidan tayin için hücre kültürü 100 uM hidrojen peroksit ile 10 dk 37oC'de inkübe edilmiş ve hücre kültüründeki nöronların oksidatif strese girmeleri sağlanmıştır. 0.5 – 32 μg/ml konsantrasyon aralığında hücre kültürüne eklenen TN-2 ve TN-3 peptitlerinin SRB testi ile antioksidan etkileri ölçülmüştür. qRT-PCR tekniği kullanılarak Bax, Bcl-2, Wnt5a, NF-κB ve 18S rRNA genlerinin ifade düzeyleri ölçülmüştür. TN-2 ve TN-3 peptiti eklenen gruptaki sitotoksisite değerleri kontrol grubuna göre düşük saptanmıştır (n=3, p<0.05). TN-1 ve TN-6 peptiti eklenen gruplarda ise kontrol grubuna göre sitotoksisite değerleri daha yüksek gözlenmiştir (n=3, p<0.05). Olası rejeneratif özelliklerinden dolayı antioksidan değerlendirme için sadece TN-2 ve TN-3 peptitleri kullanılmıştır. TN-2'nin hipokampal nöronlar üzerinde toksik etki oluşturmadığı, hidrojen peroksit ile oluşturulan oksidatif stres modelinde ise post-operatif uygulanmasının nöronların hayatta kalımlarını arttırdığı gösterilmiştir.