Therapeutic Monoclonal Antibody (IgG) Binding Properties With TNF-α and Fcγ Receptor Under Stress Conditions
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Medikal Biyoteknoloji Tezli Yüksek Lisans Programı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2019
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: GÜLİPEK GÜVEN
Danışman: Özge Can
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Son yıllarda monoklonal antikorların mekanızmalarının anlaşılması bir çok hastalığın tedavisi için umut olmuştur. Ek olarak teknolojinin her geçen gün gelişmesi ile birlikte terapötiklerin keşfi hız kazanmıştır ve piyasada her geçen payı artmaktadır. Terapötik amaçla kullanılan monoklonal antikorların (mAb) bağlanma özelliklerinin belirlenmesi medikal biyoteknoloji alanında büyük önem taşımaktadır. Çalışmada antikor/antijen ve antikor/reseptör bağlanma davranışları yüzey plazmon rezonansı tekniği ile incelenmiştir. Bu teknik sayesinde, in vitro olarak terapötik ilaçların hedef molekül veya reseptör ile bağlanma kinetik analizleri gerçek zamanlı olarak incelenmiştir. Yapılan çalışma, protein A/G immobilize edilmiş çip yüzeyinde IgG/TNF-α bağlanmasını ve anti histidin antikor ile immobilize edilmiş çip yüzeyinde Fc reseptörlerinin (FcγR) IgG'ye bağlanmasını kapsamaktadır. İlk olarak metodlar optimize edilmiştir, sonrasında mAb'lara kimyasal deamidasyon stresi uygulanarak (pH3 ve pH9, 24 ve 72 saat) bu iki yaklaşım ile Fc bölgesinin bağlanma davranışları incelenmiştir. Sonuç olarak, monoklonal antikorların Fc kısımlarının hedef bölge ile bağlanma kapasitesi stres uygulanmamış örnekler ile karşılaştırıldığında, pH 3 koşullarında azalma gözlemlenirken pH 9 koşullarında ise hafif bir değişime neden olmuştur. Ek olarak, IgG/TNF-α ve IgG/FcγRI bağlanma deneylerinde, nanomolar (E-09) seviyelerinde KD değerlerinin elde edilmesi ile sonuçlanmışken, aynı stress koşullarında FcγRIIIa , daha düşük afinitede (E-06) KD değerlerinin elde edilmesi ile sonuçlanmıştır.